光谱分析仪器不是一个仪器，而是多种仪器的一个综合，其中包括棱镜光谱仪、衍射的光栅光谱仪、干涉的光谱仪。近几年来，随着科学技术的发展，这方面的仪器也有了很大的改进。多种新型的仪器也开始陆续出现。例如光学多道分析仪，这种仪器在工作的过程中要使用到很多方面的技术，包括光子探测器、计算机操纵控制等等。这种光谱分析仪算是比较高级的仪器，能够进行多种工作，如计算、信息的采集、存储等。

光谱分析仪器的工作原理是非常复杂的，包括分析原理和物理原理。它的分析原理是根据反射物体反映的一些光谱信息，并且此时基态原子会吸收一些元素，然后观察其中的光谱减弱的程度，就可以知道元素有多少了。

除了一些分析原理之外，它还会依据一些物理原理，例如元素自身的构成，由于元素中电子的能量不同，所以它们的分布也会有所差别，并且能级也是不同的，所以原子核的能级是可以变化的。一般情况下，原子都会处在能级最低的状态，电子也会在能量技术比较低的 轨道 上运行。

如果是处在能量比较高的状态下的话，电子整个的状态是不太稳定的，所以随时会发生改变，并且很快就会返回到正常状态，也就是基态。此时不仅状态改变了，电子自身的能量也会释放一部分，并且是以光的形式，这就是原子在发射光谱的整个过程。所以光谱分析仪就可以利用这个过程来进行分析。

光谱分析仪工作的时候是基于一定的光学现象的，通过对这些现象的调查，来实现对于元素的研究。这些光学现象一般会有六种，分别是吸收、荧光、散射、发射、磷光、化学发光等等。各种光谱分析仪虽然在某些方面的性能会有所差别，但是它们基本的构成部分都是大同小异的，都有光源、单色器、检测器等构成部分。

一、方法：

在分析中必须对分光光度计设定一些必要的参数，这些参数的组合就形成一个“方法”。Lambda系列UV WinLab软件预设四类常用方法。

1)扫描(SCAN)，用以进行光谱扫描。

2)时间驱动(TIME DRIVER)，用以观察一定时间内某种特定波长处纵坐标值的变化，如酶动力学。

3)波长编程(WP)用以在多个波长下测定样品在一定时间内的纵坐标值变化，并可以计算这些纵坐标值的差或比值。

4)浓度(CONC)用以建立标准曲线并测定浓度。

二、方法的设定

扫描、波长编程及时间驱动各项方法可根据显示的参数表，逐项按需要选用或填入，并可参考提示。

浓度

浓度方法窗口下方标签较多，说明做浓度测定时需要参数较多。用鼠标指按每一标签，可翻出下页，其上有一些需要测定的参数。必须逐页设定。

三、工具条

1)SETUP

当所需的各项参数都已在参数中设好后，必须用鼠标指按SETUP，才能将仪器调整到所设状态。

2)AUTOZERO 用鼠标指按此键，分光光度计即进行调零(在光谱扫描中则进行基线校正)。

3)START 用鼠标指按此键，光度计即开始运行所设定的方法。

四、方法运行

1)扫描，时间驱动，波长编程方法选好后，先放入参比溶液，按AUTOZERO键，进行自自动校零或背景校正结束后再放入样品，按START，分光光度计即开始进行，同时屏幕上出现图形窗口，将结果显示出来。

2)浓度

3)制订标准曲线

方法选好后，确认各项数据正确，特别是REFS页中diyi行要选中右上角的“edit mode”。再放入参比溶液，按AUTOZERO键自动校零或背景校正;

按setup，待该图标消失后，再按“start”，按提示依次放入标准色列的各管溶液，每次都按提示进行操作;

标准色列测定完毕后，屏幕上出现calibgraphwindow，显示拟合的标准线，并标出各项标准管的位置，屏幕下方还有一条ConcentraTIon mode的对话框，可以用来修改拟合的曲线类型(按 change calbraTIon)，或修改标准溶液的任何一管(replace)，或取消某一管(delete)，或增加标准溶液管数(add)。如过已经满意，则按analyse sample键，进入样品测定窗口;

标准曲线有关的各项数据，均在calibresultwindow中，可用鼠标将其调出观察。其中包括每个标准溶液的具体数据，标准曲线的回程方程式，相关系数，残差;

五、样品浓度测定

刚制定好的标准曲线接着进行样品浓度测定时

1)只需在concentraTIon mode对话框按analyse sample键，进入样品测定窗口。

2 )按设定的样品顺序放入各样品管，每次按提示进行操作。

3 )屏幕上出现结果窗口，结果数据将依次显示在样品表中的相应位置。

(1)利用原有的标准曲线接着进行样品浓度测定时

(2)调出所测定样品的浓度方法文件，首先调出refs页，将原设edit mode选项取消，改设左上角的using exiting calibration。重新将方法存盘，则今后再调用时即不需再作修改。

(3) 在sample页中按要求重设各种样品名称机样品信息。

(4)按工具条中setup键，将主机设到该方法所设定的条件。

(5)将参比溶液放入比色室，按autozero键做背景校零。

(6) 按start键，按设定的样品顺序放入各样品管，每次按提示进行操作。

(7) 屏幕上出现结果窗口，结果数据将依次显示在样品表中相应位置。

六、关机

1)将方法及数据存盘

2)关闭方法窗

3)退出UV WinLab

4)取出样品及参比溶液

5)清洁光谱仪，特别是样品室

6)关闭光谱电源

7)关闭计算机电源

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